西安dna甲基化检测技术服务_西宁双荧光素酶报告基因技术服务_西安淳风生物科技有限公司
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- 1500
- 更新时间：
- 2018-03-02
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- 西安淳风生物科技有限公司
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- 谢士勇
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- 陕西 西安
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- 陕西省西安市雁塔区长安南路86号澳城大厦2号楼第2幢1单元4层10401号
详细信息
西安dna甲基化检测技术服务_西宁双荧光素酶报告基因技术服务_西安淳风生物科技有限公司
简要原理：
以重亚硫酸盐处理基因组DNA，发生甲基化的胞嘧啶不变，而未甲基化的胞嘧啶会变成尿嘧啶，经过PCR扩增，原本的C/G就变成T/A，可以通过测序区分。该方法检测精确，分辨率最高，但耗时耗力，通量有限。
实验目的：
一般以下情况可以用此方法：精细定量检测目标区段的DNA甲基化情况；结合高通量测序检测全基因组DNA甲基化情况。
试剂：
重亚硫酸盐处理试剂盒
操作步骤：
1. 高质量DNA样品抽提；
2. DNA样品处理：目前基本都是使用商业化的试剂盒，处理方法参照试剂盒说明书；
3. 引物设计：针对检测的目标区域设计PCR引物
4. PCR扩增和产物克隆：以重亚硫酸盐处理后的DNA为模板扩增，回收PCR产物后克隆的T载体上，挑取20个以上的阳性克隆进行测序；
5. 结果分析：结果分析网站。
简要原理：
以重亚硫酸盐处理基因组DNA，发生甲基化的胞嘧啶不变，而未甲基化的胞嘧啶会变成尿嘧啶，经过PCR扩增，原本的C/G就变成T/A，可以通过测序区分。该方法检测精确，分辨率最高，但耗时耗力，通量有限。
实验目的：
一般以下情况可以用此方法：精细定量检测目标区段的DNA甲基化情况；结合高通量测序检测全基因组DNA甲基化情况。
试剂：
重亚硫酸盐处理试剂盒
操作步骤：
1. 高质量DNA样品抽提；
2. DNA样品处理：目前基本都是使用商业化的试剂盒，处理方法参照试剂盒说明书；
3. 引物设计：针对检测的目标区域设计PCR引物
4. PCR扩增和产物克隆：以重亚硫酸盐处理后的DNA为模板扩增，回收PCR产物后克隆的T载体上，挑取20个以上的阳性克隆进行测序；
5. 结果分析：结果分析网站。
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